Page 41 Volume 17 - N.3 - 2009

Dor (2009) 17

remained similarly low throughout the experiment. In contrast, cytochrome P450-inflamed animals intrathecally
treated with TrkA-Ig significantly improved mechanical threshold of the abdominal region and right hind paw.
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Bladder reflex activity was strongly increased in cytochrome P450-inflamed animals. Intrathecal saline did
not alter this frequency. However, the frequency of bladder contractions was significantly reduced after
intrathecal delivery of TrkA-Ig . Our results support a role for nerve growth factor for pain and increased
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urinary frequency arising during bladder inflammation. (Dor. 2009;17(3):39-48)
Corresponding author: Célia Duarte Cruz, ccruz@med.up.pt

Key words: Nerve growth factor. Referred pain. Overactive bladder. Cystitis.

Introdução A administração intravesical ou intramuscular de
NGF também causa hiperactividade da bexiga,
A cistite intersticial/síndrome dolorosa da be- caracterizada por redução da capacidade vesi-
xiga (IC/PBS) é caracterizada por disfunção mic- cal e do intervalo de contracções 10,31,32 .
cional e dor referida . Quer em doentes quer em Neste estudo, investigamos se a redução nos
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modelos animais de IC, a dor visceral referida níveis de NGF resultaria na melhoria da dor e
pode ser detectada como um aumento da sen- hiperactividade da bexiga, associadas à cistite
sibilidade a estimulação inócua (alodinia) e nó- crónica. A redução da concentração de NGF foi
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xica (hiperalgesia) . Pensa-se que este aconte- conseguida injectando intratecalmente uma
cimento poderá ser consequência de alterações proteína recombinante, TrkA-Ig2, que se liga ao
das propriedades neuroquímicas das vias neuro- NGF com afinidade picomolar, sequestrando-o.
nais periféricas e centrais envolvidas na regulação
da função vesical . Vários potenciais candidatos
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podem contribuir para a modulação do circuito Materiais e métodos
neuronal responsável pelas diferentes sensa- Animais
ções da bexiga, incluindo as prostaglandinas,
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bradicinina, protões, entre outros . Nos últimos Ratos Wistar (Charles River, França) com um
anos, as neurotrofinas têm ganho uma especial peso entre 200-250 g foram utilizados. Todas as
atenção, uma vez que parecem contribuir para experiências decorreram de acordo com a Di-
a função normal e patológica da bexiga 6,9-12 . rectiva do Conselho das Comunidades Euro-
As neurotrofinas são factores tróficos que re- peias de 24 de Novembro 1986 (86/609/EEC) e
gulam a sobrevivência, o crescimento e a dife- as normas éticas para investigação de dor ex-
renciação das diferentes populações neuronais perimental em animais foram criteriosamente
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dos sistemas central e periférico durante o perí- seguidas . Todos os esforços foram realizados
odo de desenvolvimento e adulto 13-15 , e podem para reduzir o stress e sofrimento dos animais,
igualmente contribuir para a modulação sinápti- assim como o número de animais envolvidos. Os
ca, contribuindo desta forma para a eficiência animais foram mantidos em ciclos de 12 h luz/
sináptica a curto e longo prazo 14,16 . A família das escuro, num ambiente de temperatura controla-
neurotrofinas integra vários membros, sendo o da com acesso a comida e água ad libitum.
mais conhecido oNGF.
O NGF foi o primeiro membro da família das Reagentes e químicos
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neurotrofinas a ser descrito . Esta neurotrofina As cirurgias foram realizadas sob anestesia
pode ser sintetizada por neurónios e células profunda induzida com uma injecção intraperitone-
não-neuronais, incluindo células epiteliais 18-21 . O al de uma mistura de medetomidina (0,25 mg/kg)
NGF tem um papel essencial durante o desenvol- e quetamina (60 mg/kg), diluída em soro fisioló-
vimento do sistema nervoso periférico, regulando gico. Para as cistometrias e sacrifício, os animais
a sobrevivência dos neurónios pós-ganglionares receberam um bolus subcutâneo de uretano
simpáticos e dos aferentes primários de peque- (1,2 g/kg) como anestésico antes da determina-
no diâmetro 5,14,19,22 . Muitos estudos revelam que ção do reflexo da actividade da bexiga. A infla-
o NGF é crucial em estados de dor 23-26 . mação crónica da bexiga foi induzida por uma
No que respeita ao tracto urinário, sabe-se injecção intraperitoneal de CYP (200 mg/kg)
que em doentes com IC/PBS foram observados (Baxter Médico Farmacêutica, Lda., Portugal). A
níveis elevados de NGF na urina 27-29 . No rato, proteína recombinante TrkA-Ig2, que correspon-
durante a inflamação da bexiga induzida por de a um domínio extracelular do receptor espe-
ciclofosfamida (CYP), os níveis de NGF também cífico para NGF, foi diluída em 20 mM tampão
aumentam na parede da bexiga 10-12 . Guerios, et Tris pH 8,2, 100 mM NaCl e 10% glicerol. O
DOR al. demonstraram que a instilação intravesical anticorpo contra a proteína Fos, produzido em
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coelho, foi comprado à Oncegene, EUA. O anti-
de NGF baixou o limiar de sensibilidade a estí-
40 mulos mecânicos nas patas traseiras de ratinhos. corpo conjugado-biotinilado produzido em porco