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S. Rebelo, et al.: Papel do Factor de Transcrição DRG11 no Desenvolvimento do Sistema Nociceptivo
correspondesse ao normal. As células CGRP- e trkA- Discussão
positivas estavam ausentes do terço mais lateral do
corno dorsal, e a expressão neuronial da cinase protei- Até aos estudos que conduziram aos resultados agora
ca Cγ (PKCγ) na lâmina II interna estava completamente coligidos, era praticamente nulo o nosso conhecimento
abolida a partir do dia 2 pós-natal (P2) (Fig. 2). sobre os mecanismos moleculares que controlam o de-
senvolvimento das vias nociceptivas. No entanto, alguns
Pela utilização do método de TUNEL foi demonstrada
a ocorrência de morte celular anormalmente acentuada factores de transcrição implicados no desenvolvimento de
em embriões ko a partir do dia E17.5, ou seja, 4 dias neurónios sensitivos haviam já sido identificados, embora
após a instalação das alterações estruturais atrás refe- não exclusivamente em neurónios nociceptivos. Os genes
ridas, observação que sugere que a apoptose não da neurogenina (ngn) 1 (ngn1), a ngn 2 e o Brn3a são
conhecidos por serem necessários à diferenciação de
esteja na base dos defeitos imputados ao DRG11, mas mais do que um subtipo de neurónios sensitivos em
antes seja a sua consequência.
A comparação do número total de neurónios e de diferentes fases do desenvolvimento (Huang, et al., 1999;
neurónios CGRP- ou trkA-positivos dos gânglios raqui- Ma, et al., 1999). Factores de transcrição pertencentes ao
dianos L3 e L4 em ratinhos ko e wt, através da utilização domínio ETS, como o ER81 e o PEA3 estão presentes
numa subpopulação de neurónios proprioceptivos e nos
de métodos estereológicos (Cavalieri, 1966; Weibel, 1979; seus alvos centrais, os motoneurónios (Arber, et al., 2000).
Gundersen e Jensen, 1987), não revelou diferenças em
embriões E14.5. Nos adultos, no entanto, verificava-se Outros estudos revelam que mutações em genes como o
um decréscimo de cerca de 30% do número total de NGF (Crowley, et al., 1994), o seu receptor trkA (Smeyne,
células coradas pelo método de Nissl (p < 0,05), e et al., 1994), a ngn1 (Ma, et al., 1999) e o Brn3.0 (McEvilly,
et al., 1996; Xiang, et al., 1996), afectam o desenvolvimen-
idêntico decréscimo nos neurónios CGRP e trkA positi- to de nociceptores. Contudo, nenhuma destas mutações
vos em ratinhos ko. O número de neurónios grandes que
expressavam neurofilamento 52 (NF52), marcador de afecta o estabelecimento inicial das conexões entre o
células grandes do gânglio raquidiano, não era significa- gânglio raquidiano e o corno dorsal espinhal.
Neste trabalho é demonstrada a participação do
tivamente diferente entre os animais wt e ko. factor de transcrição DRG11 na diferenciação do circui-
O estudo, em microscopia confocal, da enervação
por fibras CGRP-positivas de vários tecidos periféricos, to nociceptivo. A mutação do gene drg11 contribui para
nomeadamente a parede da bexiga, a pele do dorso e deficiências na morfogénese do corno dorsal espinhal
plantar e a membrana sinovial, revelou redução consi- que se associam a alterações de natureza espaçotem-
derável da área ocupada por fibras imunorreactivas em poral no padrão de projecção das fibras aferentes
ratinhos ko por comparação com os wt, em todos os
tipos de tecidos (Fig. 3).
Ficou assim provado que a redução, em animais adul- +/+ –/–
tos, do número de neurónios CGRP e trkA dos gânglios
raquidianos compromete a enervação periférica, devendo
por si só constituir um agente importante dos defeitos
nociceptivos.

A

A

B
B

Figura 2. Projecção das fibras sensitivas aferentes
primárias e perda de neurónios no corno dorsal da
-/-
medula espinhal em ratinhos drg11 . (A) As fibras
aferentes primárias nociceptivas, identificadas por C
imunorreacção para o CGRP, encontram-se em número
reduzido na porção lateral do corno dorsal da medula
espinhal (entre cabeças das setas). (B) A expressão Figura 3. Enervação por fibras imunorreactivas para
neuronial da proteína cinase C γ (PKCγ) está o CGRP de vários tecidos periféricos em ratinhos
-/-
completamente abolida da lamina IIi (seta grande em wild-type e drg11 . (A) Pele lombar. (B) Bexiga. (C)
curva). Notar a presença de marcação no tracto Tecido sinovial. Notar a diminuição da área ocupada DOR
corticoespinhal, que serve como controlo positivo da por fibras imunorreactivas em todos os tecidos, em
-/-
reacção de imunocitoquímica (setas pequenas). ratinhos drg11 .
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