Page 24 Volume 12, Número 4, 2004

C.D. Cruz, et al.: A Estimulação Mecânica de Articulações Monoartríticas Induz Fosforilação das ERKs 1 e 2 na Medula Espinhal

Tabela 1. Número de células pERKs 1 e 2 positivas nos segmentos L3-L5 da medula espinhal de ratos MA. Dados
apresentados como média ± erro médio
Grupos experimentais Número total Lam I-III Lam IV-VI Lam VII-IX Lam X

Controlo NE 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0
Controlo E 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0
2 d MA-NE 0,7 ± 0,5 0,5 ± 0,3 0,2 ± 0,2 0 ± 0 0 ± 0
†
†
2 d MA-E 14,5 ± 2,9* 11,2 ± 1,9* 2,9 ± 0,9 0,2 ± 0,1 0,2 ± 0,1 ‡
4 d MA-NE 0,5 ± 0,4 0,5 ± 0,4 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0
4 d MA-E 16,6 ± 1,9* 12,3 ± 1,4* 3,6 ± 0,5 0,5 ± 0,1 0,2 ± 0,0 ‡
†
†
7 d MA-NE 1,1 ± 0,9 1,1 ± 0,9 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0
†
†
7 d MA-E 43,0 ± 5,1* 22,1 ± 2,6* 15,5 ± 2,1 5,0 ± 0,7 0,4 ± 0,2 ‡
14 d MA-NE 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0
†
†
14 d MA-E 50,7 ± 9,5* 33,0 ± 4,6* 12,1 ± 3,2 3,7 ± 1,3 1,9 ± 0,5 ‡
NE e E correspondem a animais não estimulados e estimulados, respectivamente; MA indica a presença de monoartrite. Valores a
negrito correspondem a diferenças estatísticas significativas (p < 0,05) entre animais não estimulados e estimulados para o mesmo
ponto temporal, bem como a diferenças estatísticas significativas (p < 0,05) quando comparados com os grupos controlo; * corresponde
‡
a diferenças significativas entre a fase inicial (2 e 4 dias) e a fase tardia (7 e 14 dias) de MA (p < 0,001; teste T); e correspondem a
†
diferenças estatísticas significativas entre as fases inicial (2 e 4 dias) e tardia (7 e 14 dias) de MA (p < 0,001 ou p < 0,01,
respectivamente; teste Mann-Whitney).
Pelo contrário, o número de células imunor- comparado com as fatias de animais MA-NE
reactivas em fatias da medula espinhal de ani- para os mesmos tempos (p < 0,05). Além disso,
mais MA estimulados (E) estava bastante aumen- à medida que a inflamação progrediu, foi pos-
tado em todos os tempos da inflamação, quando sível observar um aumento do número de célu-
las pERKs positivas nos segmentos L3-L5 da
medula espinhal de ratos estimulados. Assim,
em fatias de animais com 2 e 4 dias MA-E, o
número total de células pERKs positivas/fatia foi
de 14,5 ± 2,9 e 16,6 ± 1,9, respectivamente
(Tabela 1, Figs. 2C e 3). Aos 7 e 14 dias de MA,
a estimulação induziu um aumento da activação,
tendo-se então observado 43,0 ± 5,1 e 50,7 ± 9,5
células pERKs positivas/fatia, respectivamente
(Tabela 1, Figs. 2D, 2E e 3). As diferenças ob-
servadas entre animais estimulados na fase ini-
cial (2 e 4 d) e final (7 e 14 d) de MA são esta-
tisticamente significativas (p < 0,001) (Fig. 3).
Nas várias lâminas dos segmentos L3-L5 da
medula espinhal de animais MA-E, verificou-se
que ocorriam diferenças significativas entre di-
versos grupos. Assim, nas lâminas superficiais
(I-III) do corno dorsal observou-se a todos os
tempos de MA um número de células IR que
era significativamente superior ao observado
Figura 2. Microfotografias de cortes da medula espinhal em fatias da medula espinhal de animais con-
(segmento L4) de ratos injectados no tornozelo com soro trolo (p < 0,05) (Tabela 1, Fig. 4). Além disso,
fisiológico (controlo) ou monoartríticos (MA) evidenciando aos 7 e 14 dias de MA, a fase tardia da do-
células imunorreactivas para a forma fosforilada das ERKs.
A) Controlo, estimulado. B) 7 dias MA, não estimulado: não ença estudada neste trabalho, observou-se
são observados níveis significativos de imunorreactividade um aumento estatisticamente significativo em
em nenhum dos lados da medula espinhal. C) 2 dias MA, comparação com a fase mais inicial da doen-
estimulado: observaram-se células imunorreactivas nas ça (p < 0,001) (Tabela 1, Fig. 4). No corno
lâminas superficiais do corno dorsal (lâminas I-III). A dorsal profundo (lâminas IV-VI), foram observa-
imunorreacção surgia apenas no lado ipsilateral à injecção
de CFA e estimulação. D) 7 dias MA, estimulado: o número das menos células que nas lâminas superfi-
de células imunorreactivas aumentou significativamente ciais. Ainda assim, a todos os tempos de MA,
nas lâminas superficiais da medula espinhal. Foram ainda o número de células IR era significativamente
observadas células imunorreactivas nas lâminas profundas superior ao observado em fatias de animais
do corno dorsal (lâminas IV-VI) e no corno ventral ipsilateral.
E) 14 dias MA, estimulado: os resultados observados controlo (p < 0,001) (Tabela 1, Fig. 4). Também
foram semelhantes aos encontrados em cortes de medula nesta zona foi possível observar um aumento
espinhal de ratos estimulados com 7 dias de MA. Além significativo do número de células IR na fase DOR
disso, foram também observadas algumas células tardia da doença (p < 0,001) (Tabela 1, Fig. 4).
imunorreactivas na lâmina X. Barra de calibração = 200 µm. Aos 7 e 14 dias de MA, foi também encontrada 23