Page 17 Volume 20 - N2 - 2012

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variância (ANOVA) de uma via de forma a inves- período a partir do qual se notou um decréscimo,
tigar possíveis diferenças estatísticas. Esta aná- muito embora aos 7 e 14 dias de MA a expres-
lise foi seguida de testes post hoc adequados são de ATF-3 tenha sido ainda bem maior do
sempre que o valor de significância foi p < 0,05. que nos controlos. Estes aumentos foram obser-
O teste post hoc Bonferroni foi utilizado para vados nos três níveis de gânglios analisados (L ,
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discriminar diferenças significativas entre os di- L e L ), mas as diferenças foram mais significa-
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ferentes grupos experimentais, no que diz res- tivas nos gânglios L e L (Fig. 1 F), enquanto © Permanyer Portugal 2012
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peito à expressão individual de ATF-3 e às reac- nos animais-controlo foi encontrada uma expres-
ções triplas contra ATF-3, CGRP e IB4. Este são praticamente nula de ATF-3 (Fig. 1 A). Diferen-
teste foi também utilizado para avaliar possíveis ças estatisticamente significativas foram encon-
diferenças nos diâmetros das patas dos animais. tradas apenas para os animais com quatro dias
Realizou-se o teste post hoc de comparação de MA nos gânglios L , e animais com dois e qua-
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múltipla de Newman-Keuls com o objectivo de tro dias de MA nos gânglios L (p < 0,05; ANOVA
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encontrar diferenças significativas na distribui- de uma via seguido do teste post hoc Bonferroni;
ção por tamanhos das células IR tanto a ATF-3 Fig. 1 F). Não foi encontrada expressão relevan-
como CGRP. Este teste foi também utilizado na te de ATF-3 em neurónios de DRG contralaterais
comparação dos diferentes grupos de ratos MA em nenhum grupo experimental (Fig. 1 C).
que sofreram tratamento com cetoprofeno (2 d
cetoprofeno e 4 d cetoprofeno) e respectivos As células que expressam ATF-3 são
controlos (animais MA sem tratamento com o maioritariamente neurónios pequenos a médios
fármaco), de forma a discriminar diferenças na A medida das áreas das células positivas para
expressão de ATF-3 e CGRP.
ATF-3 na MA indicou que estes neurónios são
na sua maioria pequenos e médios. Esta obser-
Resultados vação é particularmente notória nos tempos
A monoartrite foi induzida com sucesso mais tardios da doença (7 e 14 dias de MA),
onde os número de células ATF-3 positivas per-
em todos os animais tencentes ao grupo dos neurónios de tamanho
Todos os animais injectados com CFA apre- grande (> 1.200 µm ) é muito menor que o nú-
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sentaram sintomas inflamatórios severos tais mero daquelas que pertencem ao grupo dos
como inchaço, vermelhidão e transferência de neurónios de tamanho pequeno (< 600 µm ) ou
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peso para a pata não inflamada. Estes sintomas médio (600 a 1.200 µm ) (Fig. 1 G). A análise
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reflectiram-se em graus inflamatórios perto de 4 estatística demonstrou diferenças significativas
(valor máximo na escala descrita por Castro- no número de células IR ao ATF-3, entre as três
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Lopes, et al. ) logo após o segundo dia de MA classes de tamanhos, apenas para os animais
(3,67 ± 0,12; Fig. 1 D), condição esta que se com 14 dias de MA (1,29 ± 0,24; 2,15 ± 0,38 e
o
manteve até ao 14. dia (3,75 ± 0,13; Fig. 1 D), 0,30 ± 0,10 células ATF-3 IR/corte para os gru-
o que aliás está de acordo com outros estu- pos de tamanhos < 600, 600-1.200 e > 1.200 Sem o consentimento prévio por escrito do editor, não se pode reproduzir nem fotocopiar nenhuma parte desta publicação.
dos 31,32 . Os controlos exibiram graus inflamató- µm , respectivamente). A maior significância es-
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rios insignificantes (0,67 ± 0,11), reflectindo míni- tatística foi encontrada para as diferenças entre
mos sintomas inflamatórios possivelmente devido as células ATF-3 positivas de médio e grande
a trauma local causado pela injecção de veícu- tamanho (p < 0,001, ANOVA de uma via seguido
lo. O diâmetro das patas inflamadas dos animais por teste post hoc de comparação múltipla de
MA apresentou-se significativamente (p < 0,001) Newman-Keuls), no fundo reflectindo o pequeno
maior (1,24 ± 0,03 cm de diâmetro para 4 d MA, número de células que expressam ATF-3 com
por exemplo) a todos os tempos de inflamação área superior a 1.200 µm (Fig. 1 G).
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quando comparados com os respectivos ani-
mais controlo (0,59 ± 0,02 cm; Fig. 1 E). A expressão de ATF-3 é maior em neurónios
Conclui-se assim que a MA foi induzida com peptidérgicos do que não-peptidérgicos
sucesso e homogeneamente em todos os ani-
mais injectados com CFA, já que todos eles de- Nas reacções triplas realizadas contra ATF-3,
monstraram respostas fisiológicas semelhantes CGRP e IB4, a análise individual da expressão de
a cada tempo de progressão da doença. Todos ATF-3 (Fig. 2 A) corroborou com os dados previa-
os animais com sinais de desenvolvimento de mente obtidos confirmando que na MA há uma
poliartrite foram excluídos. indução da expressão deste factor de transcrição
nos neurónios aferentes primários do lado ipsi-
lateral à pata inflamada. Desta forma, a expressão
A expressão de ATF-3 é grandemente induzida de ATF-3 foi sempre mais elevada nos animais MA
nos aferentes primários durante a MA quando comparando com os controlos não infla-
A expressão de ATF-3 foi induzida nos neuró- mados que mostraram níveis insignificantes da
nios dos DRG ipsilaterais de ratos MA, a todos expressão desta proteína (0,06% ± 0,06 células
DOR os tempos de inflamação (Figs. 1 B e F). O nú- ATF-3 IR na população total de neurónios). As-
mero de células IR ao ATF-3 por corte aumentou
sim como nos resultados anteriores, os animais
16 significativamente aos dois e quatro dias de MA, com dois (6,07% ± 1,02 células ATF-3 IR na